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Immunomarquages

Immunomarquage – analyses de routine

Bioalternatives réalise des prestations d’immunomarquage afin de mettre en évidence des constituants cellulaires et tissulaires au sein d’une coupe de tissus. Les protéines d’intérêt (antigènes) sont localisées grâce à l’utilisation d’anticorps polyclonaux ou monoclonaux dirigés spécifiquement contre elles.

Notre laboratoire réalise des marquages par méthode directe (anticorps couplé directement à un traceur) et indirecte (anticorps primaire non marqué et reconnu spécifiquement par un anticorps secondaire marqué par un traceur) sur différents types de tissus : tissus reconstruits, explants, et biopsies, d’origine humaine ou animale, inclus en paraffine (FFPE) ou congelés.

Les méthodes de détection mises en oeuvre dépendent directement du type de traceur utilisé. Ainsi, notre laboratoire utilise des techniques spéciales de détection in situ : l’immunofluorescence et l’immunohistochimie.

  • L’immunofluorescence est une méthode qui consiste à détecter et localiser une protéine d’intérêt à l’aide d’un anticorps spécifique (directement couplé à un fluorochrome ou révelé par un anticorps secondaire fluorescent). L’immunomarquage des protéines d’intérêt est généralement associé à un marquage des noyaux par coloration de Hoechst ou par coloration à l’iodure de propidium. Couplée à un logiciel de traitement de l’image (ex : ImageJ), cette technique permet également de générer des données d’intensité de fluorescence pouvant faire l’objet d’une analyse quantitative. Il est également possible de réaliser des co-marquages par cette technique.

  • L’immunohistochimie par révélation enzymatique consiste également à détecter et à localiser au sein d’une coupe de tissu une protéine d’intérêt à l’aide d’un anticorps spécifique. Cet anticorps sera ici révélé par une réaction enzymatique (comme la peroxydase) générant un précipité rouge à partir d’un chromogène de type AEC (Aminoethyl carbazole).

RHE-caspase14_IF

RHE-caspase14_IF

Skin pso-CD4-IHC

Skin pso-CD4-IHC

Skin-PHN-coll6-IF

Skin-PHN-coll6-IF

Skin ear-caspase14-IHC

Skin ear-caspase14-IHC

Skin-PHN-KRT16-IF

Skin-PHN-KRT16-IF

Skin-PHN-LaminA-IHC

Skin-PHN-LaminA-IHC

Skin-Laminin-IF

Skin-Laminin-IF

RHE-envoplakin-IHC

RHE-envoplakin-IHC

RHE-MRP8-IF

RHE-MRP8-IF

Skin Dermis-Fibulin3-IHC

Skin Dermis-Fibulin3-IHC

Skin-PHN-IntegrinB1-IF

Skin-PHN-IntegrinB1-IF

Skin-PHN-Collagen6-IHC

Skin-PHN-Collagen6-IHC

Skin-PHN-Cytokeratin1-IF

Skin-PHN-Cytokeratin1-IF

RHE-Kallikrein7-IHC

RHE-Kallikrein7-IHC

RHE-TGFBR1-IF

RHE-TGFBR1-IF

Nous évaluons les conditions d’immunomarquages en fonction du type d’anticorps choisi (fixation de l’échantillon par congélation ou inclusion en paraffine, IF et/ou IHC).

Notre laboratoire d’histologie a validé plus de 120 marqueurs et est à votre disposition pour toute demande d’immunomarquages, contactez-nous !

Voici une liste non exhaustive des biomarqueurs validés et proposés :

Liste complète disponible sur demande, contactez-nous !

BIOMARQUEURS
Androgen receptor
Beta defensin 2
Caspase 14
Cathelicidin antimicrobial protein (CAP18)
CD1a
CD209 DC-SIGN
CD44
Claudin 1
Claudin 4
Collagen type I
Collagen type III
Collagen IV
Collagen type VII
Corneodesmosin
Cytokeratin-10
Cytokeratin-14
Cytokeratin-15
Cytokeratin-19
Cytokeratin-6
Cytokeratin-7
Decorin
Desmocollin 1
Desmoglein
Desmoglein 3
E-cadhérine
Epithelial membrane antigen
Elafin
Elastin
Envoplakin
Epiplakin
Fibrillin-1
BIOMARQUEURS
Fibronectin
Filaggrin
Hyaluronic Acid
Integrin alpha2
Integrin alpha2 beta1
Integrin beta4
Integrin α6
Involucrin
Kallikrein 5
Kallikrein 7
Ki67
Laminin-5
Langerin
Loricrin
Lumican
Melanoma associated antigen
Nidogen
Occludin
Perlecan
Pro-collagen type I
Psoriasin
RNASE7
Sirtuin 1
Tenascin C
Thymine dimer
Transglutaminase 1
TRP1
Tyrosinase
TYRP-1
Zonula Occludens
etc…

Immunomarquage – développements à façon

Bioalternatives propose également des services personnalisés de recherche et validation d’anticorps. L’identification et la validation des anticorps sont des étapes importantes dans le processus de développement d’anticorps. Après une première étude bibliographique poussée, Bioalternatives évalue les conditions de marquage en fonction du type d’anticorps choisi.

Nos équipes sont à votre service pour toute demande de développement à façon, contactez-nous !

Skin-CD44 blue grey-KRT15 red-IHC

Skin-CD44 blue grey-KRT15 red-IHC

Skin-KRT10 red-KRT15 blue grey-IHC

Skin-KRT10 red-KRT15 blue grey-IHC

Skin-KRT10 green-KRT5 in red-Nuclei blue-IF

Skin-KRT10 green-KRT5 in red-Nuclei blue-IF

Skin-CD44 purple-langerin blue grey-IHC

Skin-CD44 purple-langerin blue grey-IHC

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