Bioalternatives réalise des prestations d’immunomarquage afin de mettre en évidence des constituants cellulaires et tissulaires au sein d’une coupe de tissus. Les protéines d’intérêt (antigènes) sont localisées grâce à l’utilisation d’anticorps polyclonaux ou monoclonaux dirigés spécifiquement contre elles.

Notre laboratoire réalise des marquages par méthode directe (anticorps couplé directement à un traceur) et indirecte (anticorps primaire non marqué et reconnu spécifiquement par un anticorps secondaire marqué par un traceur) sur différents types de tissus : tissus reconstruits, explants, et biopsies, d’origine humaine ou animale, inclus en paraffine (FFPE) ou congelés.

Les méthodes de détection mises en oeuvre dépendent directement du type de traceur utilisé. Ainsi, notre laboratoire utilise des techniques spéciales de détection in situ : l’immunofluorescence et l’immunohistochimie.

• L’immunofluorescence est une méthode qui consiste à détecter et localiser une protéine d’intérêt à l’aide d’un anticorps spécifique (directement couplé à un fluorochrome ou révelé par un anticorps secondaire fluorescent). L’immunomarquage des protéines d’intérêt est généralement associé à un marquage des noyaux par coloration de Hoechst ou par coloration à l’iodure de propidium. Couplée à un logiciel de traitement de l’image (ex : ImageJ), cette technique permet également de générer des données d’intensité de fluorescence pouvant faire l’objet d’une analyse quantitative. Il est également possible de réaliser des co-marquages par cette technique.

• L’immunohistochimie par révélation enzymatique consiste également à détecter et à localiser au sein d’une coupe de tissu une protéine d’intérêt à l’aide d’un anticorps spécifique. Cet anticorps sera ici révélé par une réaction enzymatique (comme la peroxydase) générant un précipité rouge à partir d’un chromogène de type AEC (Aminoethyl carbazole).