A Bioalternatives iniciou um programa de P&D de engenharia de tecido para desenvolver um modelo equivalente de pele que incorpore as células de melanoma.
Após diferentes testes em culturas em monocamadas, duas linhagens de câncer produzidas por melanomas (entre aquelas disponíveis na Bioalternatives) foram selecionadas para serem integradas como padrão em um modelo equivalente de pele normal (cultura 3D):
- Linhagem A-375 (ATCC® CRL1619): células produzidas de melanoma metastático
- Linhagem WM266-4 (ATCC® CRL1676): células produzidas de melanoma metastático
A cultura celular 3D permitiu que obtivéssemos dois modelos correspondentes a diferentes estágios de desenvolvimento e de gravidade, nos quais:
- A linhagem A-375 apresenta perfil agressivo e resulta na destruição muito importante da epiderme e invasão equivalente da derme durante o tempo de cultura
- A linhagem WM266-4 desenvolve uma resposta menos agressiva: após 10 a 12 dias de cultura, a parte da epiderme de pele reconstruída mostra histologia amplamente boa e as células de câncer formam grupos que são facilmente identificáveis na histologia. O tamanho do agrupamento aumenta com o tempo de cultura.
Figura 1: Marcação de imunofluorescência das proteínas Pmel-17, Ki67 e S100 em um modelo de pele reconstruída com melanócitos e em modelos de pele reconstruída com melanoma
Nosso objetivo
O nosso objetivo é propor modelos personalizados e coerentes e métodos que respondam aos problemas enfrentados em projetos de pesquisa pela indústria. Agora podemos oferecer a oportunidade de usar diretamente diferentes modelos, seja para estudos farmacológicos ou para realizar programas de parceria de P&D relacionados à pesquisa do melanoma.
Atualmente temos soluções analíticas em farmacologia celular e molecular para concluir rapidamente projetos, mas também para garantir o desenvolvimento de outros métodos de análise. Nós beneficiamos de uma grande experiência no desenvolvimento de protocolos para modelizar patologias (inflamação, infecção, senescência, degeneração) ou agressão (estresse UV, cicatrização).
Melanoma em poucas palavras
O melanoma é um tumor cutâneo ligado à proliferação descontrolada de melanócitos. Embora contabilize apenas 3 a 5 casos em uma população de 100.000, representa 75% das causas de mortalidade por câncer devido à sua evolução e propagação extremamente rápidas. Este fenômeno geralmente ocorre após lesão física ou química da pele, como lesão causada por exposição intensa ao sol. Na maioria dos casos, o melanoma é descoberto quando uma pinta de cor escura aparece na pele (80% dos casos) ou quando uma verruga pré-existente muda de cor ou forma.
Figura 2: Modelo de pele reconstruída com melanoma
Os melanomas se desenvolvem em três estágios diferentes:
- Primeiro estágio: fase de crescimento radial (RGP): os melanócitos se multiplicam horizontalmente de maneira anormal e permanecem junto à lâmina basal
- Segundo estágio: fase de crescimento vertical (VGP): as células se proliferam muito rapidamente. Elas conseguem se multiplicar verticalmente e então invadem a derme pela liberação significativa de metaloproteinases. Essas enzimas proteolíticas podem degradar a matriz extracelular e a membrana basal e assim promovem o crescimento do melanoma.
- Terceiro estágio: estágio metastático: o estágio de crescimento final do melanoma quando ele adquire a capacidade de intravasamento e, então, pode formar metástases e se difundir para outros órgãos
Os mecanismos de transição entre esses diferentes estágios não são bem compreendidos ainda. Entretanto, vários estudos possibilitaram a identificação dos genes envolvidos nessas transições.